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Méthodes en immunologie
(2014)
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Abstract
Cet ouvrage, rédigé sous l'égide de l'Assim, offre un tour d'horizon complet et synthétique de toutes les méthodes actuelles en immunologie. Il en recense les différentes pratiques, partant des principes de la méthode à leur application. Il s'articule en deux grandes parties : la première portant sur les techniques elles-mêmes ; la seconde dédiée à des domaines d'applications spécifiques et mobilisant parfois une grande diversité de techniques.
Chacun des 14 chapitres est étayé d'illustrations et de tableaux synthétiques, et construit de telle sorte que le lecteur y retrouve:
- une présentation générale de chaque technique ;
- une description synoptique de la méthodologie ;
- des recommandations spécifiques de mise en oeuvre ;
- des indications sur le mode de présentation des résultats ;
- des informations sur la validation des résultats ;
- un point sur les avantages et les inconvénients propres à chaque technique ;
- des exemples d'application pratiques.
Table of Contents
| Section Title | Page | Action | Price |
|---|---|---|---|
| Cover | Cover | ||
| Méthodes en immunologie : Des principes aux bonnes applications | iii | ||
| Copyright | iv | ||
| Liste des collaborateurs | v | ||
| Abréviations | ix | ||
| Avant-propos | xi | ||
| Table des matières | xiii | ||
| Introduction générale | 1 | ||
| Points clés du système immunitaire | 1 | ||
| Introduction sur les techniques immunologiques | 4 | ||
| Partie I: Techniques immunologiques | 7 | ||
| Chapitre 1: L'antigène comme réactif: définition et propriétés | 9 | ||
| Caractéristiques des antigènes | 9 | ||
| Nature chimique, origine et localisation des antigènes | 9 | ||
| Thermodynamique de la réaction antigène–anticorps | 10 | ||
| Qualité de l'antigène et interactions antigène–récepteur | 10 | ||
| Propriétés des antigènes influant sur les méthodes de dosage | 11 | ||
| Autres facteurs conditionnant l'interaction antigène–récepteur | 13 | ||
| Particularités des allergènes | 13 | ||
| Chapitre 2: Les anticorps comme réactifs | 15 | ||
| Rappels sur les anticorps | 15 | ||
| Préparation d'anticorps polyclonaux | 17 | ||
| Préparation d'anticorps monoclonaux | 19 | ||
| Conservation des anticorps | 22 | ||
| Intérêts respectifs des anticorps polyclonaux et monoclonaux | 23 | ||
| Chapitre 3: Techniques sans traceur | 25 | ||
| Immunoprécipitation | 25 | ||
| Méthodologie | 25 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 26 | ||
| Avantages/inconvénients | 27 | ||
| Exemples d'applications | 27 | ||
| Immunodiffusion | 28 | ||
| Méthodologie | 28 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 28 | ||
| Avantages/inconvénients | 30 | ||
| Exemples d'applications | 30 | ||
| Immunochromatographie | 31 | ||
| Méthodologie | 31 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 33 | ||
| Avantages/inconvénients | 33 | ||
| Exemples d'applications | 33 | ||
| Mesure d'affinité par résonance plasmonique de surface | 34 | ||
| Méthodologie | 34 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 35 | ||
| Avantages/inconvénients | 35 | ||
| Exemples d'applications | 35 | ||
| Agglutination immunologique | 35 | ||
| Méthodologie | 36 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 37 | ||
| Avantages/inconvénients | 38 | ||
| Exemples d'applications | 38 | ||
| Mise à profit des capacités cytotoxiques du complément | 38 | ||
| Méthodologie | 39 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 39 | ||
| Avantages/inconvénients | 39 | ||
| Exemples d'applications | 39 | ||
| Chapitre 4: Techniques avec traceurs | 41 | ||
| Types de traceurs | 41 | ||
| Les enzymes comme traceurs | 41 | ||
| Les fluorochromes comme traceurs | 43 | ||
| Les radio-isotopes comme traceurs | 43 | ||
| Dosages immuno-enzymatiques (ELISA) ou immuno-fluorescents (FLISA) | 46 | ||
| Méthodologie | 47 | ||
| Adsorption des molécules | 47 | ||
| Saturation du support adsorbant | 50 | ||
| Première réaction antigène–anticorps | 50 | ||
| Deuxième réaction antigène–anticorps | 50 | ||
| Révélation\x0B | 50 | ||
| Expression des résultats | 50 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 50 | ||
| Avantages/inconvénients | 51 | ||
| Exemples d'applications | 51 | ||
| Dosages radio-immunologiques (RIA) | 51 | ||
| Méthodologie | 52 | ||
| Méthode par compétition (ou par défaut d'anticorps) | 52 | ||
| Méthode sandwich | 52 | ||
| Méthode par immunoprécipitation en phase liquide (e.g. test de Farr pour le dosage des auto-anticorps anti-ADN double ... | 52 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 52 | ||
| Avantages/inconvénients | 53 | ||
| Exemples d'applications | 53 | ||
| Immunodosages multiplex sur billes | 53 | ||
| Méthodologie | 54 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 54 | ||
| Avantages/inconvénients | 54 | ||
| Exemples d'applications | 54 | ||
| Immuno-empreinte/western-blot | 55 | ||
| Méthodologie | 55 | ||
| Séparation protéique | 55 | ||
| Transfert | 55 | ||
| Saturation et lavages | 56 | ||
| Révélation et analyse des résultats | 56 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 57 | ||
| Avantages/inconvénients | 57 | ||
| Partie II: Exemples d'applications | 155 | ||
| Chapitre 8: Exploration du complément | 157 | ||
| Complément hémolytique | 157 | ||
| Méthodologie | 157 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 157 | ||
| Exemples d'applications | 157 | ||
| Dosage des fractions, expression des récepteurs | 158 | ||
| Méthodologies | 158 | ||
| Techniques quantitatives | 158 | ||
| Techniques semi-quantitatives | 160 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 160 | ||
| Exemples d'applications | 160 | ||
| Récepteurs du complément | 160 | ||
| Ligands du complément | 161 | ||
| Exploration de l'angiœdème | 162 | ||
| Méthodologie | 163 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 165 | ||
| Chapitre 9: Exploration des immunoglobulines | 167 | ||
| Immunoglobulines monoclonales: méthodes diagnostiques | 167 | ||
| Méthodologies qualitatives | 167 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 170 | ||
| Particularités des recherches d'immunoglobulines monoclonales | 171 | ||
| Méthodologies quantitatives | 171 | ||
| Cryoglobulines | 173 | ||
| Gammapathies monoclonales à activité auto-anticorps | 174 | ||
| Recherche d'anticorps spécifiques | 174 | ||
| Chapitre 10: Détection/dosage des cytokines et de leurs récepteurs | 179 | ||
| Méthodologie | 181 | ||
| Dosages de cytokines ou de leurs récepteurs solubles | 181 | ||
| Détection in situ ou au niveau cellulaire | 182 | ||
| Étude des ARNm | 183 | ||
| Étude de l'ADN, polymorphismes | 183 | ||
| Recommandations de mise en œuvre | 183 | ||
| Avantages/inconvénients | 185 | ||
| Exemples d'applications | 185 | ||
| Chapitre 11: Exploration du complexe majeur d'histocompatibilité | 187 | ||
| Typage du HLA en sérologie | 188 | ||
| Typage du HLA par biologie moléculaire | 188 | ||
| Avantages/inconvénients | 188 | ||
| Exemples d'applications | 188 | ||
| Épreuves de compatibilité tissulaire | 189 | ||
| Étude du chimérisme donneur–receveur après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques | 189 | ||
| Tétramères CMH–peptides | 189 | ||
| Chapitre 12: Hypermutations somatiques et translocations chromosomiques | 191 | ||
| Hypermutations somatiques | 191 | ||
| Méthodologie | 191 | ||
| Index | 211 | ||
| Imprint page | 214 |